為什么不先對一個基因做預(yù)測,在預(yù)測的結(jié)果上直接做共定位?
不同的預(yù)測網(wǎng)站有不同的計算方法,同一個基因在不同的預(yù)測網(wǎng)站也可能得出不同的定位結(jié)果。另外所有的結(jié)果都應(yīng)是基于實驗得到的,對于不清楚可能定位在哪里的基因,一般推薦先做普通定位,根據(jù)普通定位的結(jié)果再決定做哪種細胞器的共定位。
為什么有的基因做原生質(zhì)體轉(zhuǎn)化時熒光蛋白不亮?
不同物種的細胞可能對基因表達有影響,當在一種材料的原生質(zhì)體中觀察不到熒光時,可以考慮換一種受體材料。另外,如果是分泌蛋白,在原生質(zhì)體中無法觀察到熒光,此時可以考慮注射葉片來觀察熒光。
拍攝時為什么有明場通道?
(1)顯示細胞狀態(tài),有活力的原生質(zhì)體細胞應(yīng)該是飽滿圓潤的,變形或破碎的細胞說明此時細胞不是適狀態(tài)或細胞已。
(2)顯示熒光確實是細胞內(nèi)蛋白表達的,而不是細胞碎片及雜質(zhì)產(chǎn)生的雜光。
植物細胞中的另一個重要組成部分是液泡。液泡是充滿液體的囊泡,它們在細胞的中央位置,并且包含著大量的水分和離子。液泡對于細胞的形態(tài)、生長和發(fā)育都起著重要的作用,同時也在細胞內(nèi)起著重要的儲存作用。
植物細胞的另一個特點是它們具有葉綠體。葉綠體是進行光合作用的地方,它們含有綠色的葉綠素,可以幫助植物吸收太陽光能,并將其轉(zhuǎn)化為化學能,為植物的生長和發(fā)育提供能量。
雙分子熒光互補(Bimolecular Fluorescence Complementation,BiFC)是一種用于研究蛋白質(zhì)-蛋白質(zhì)相互作用的強大技術(shù)。它利用熒光蛋白的特性,將兩個不同的熒光蛋白片段(通常是黃色熒光蛋白和綠色熒光蛋白)分別與兩個不同的蛋白質(zhì)結(jié)合,以檢測它們之間的相互作用。
BiFC的原理是基于熒光蛋白的特性,這些熒光蛋白可以發(fā)射出特定的光子,從而在細胞中產(chǎn)生熒光信號。當兩個不同的熒光蛋白片段結(jié)合在一起時,它們會形成一個完整的熒光蛋白,并發(fā)出更強的熒光信號。因此,通過觀察熒光信號的強度和分布,我們可以推斷出兩個蛋白質(zhì)是否相互作用以及相互作用的確切位置。