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   日期:2024-03-17     作者:格維恩    瀏覽:31    評論:0    
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大腸實驗步驟(—)培養基1、普通乳糖蛋白胨培養液亞硫酸鈉培養基(供平板分離用)蛋白胨 10g, 乳糖 10g,K2HPO4 3.5g,瓊脂 15~20g,蒸餾水1000mL,無水亞硫酸鈉 5g,5%的堿性品紅乙醇溶液 20mL,pH 7.2~7.4。4、培養基(EMB培養基)(供發酵法平板分離用,3和4可任選一種)蛋白胨10g,乳糖10g,K2HPO4 2.0g,瓊脂20g,蒸餾水1000mL,2%伊紅(曙紅)水溶液 20mL,5%美藍(亞甲藍)水溶液13mL,pH 7.2~7.4。(二)滅菌移液管、滅菌稀釋水、試管、杜漢氏小管、革蘭氏染色液、滅菌培養皿。(一)水樣的采集供細菌學檢驗的水樣,必須按一般無菌操作的基本要求采集,并保證再運送、貯存過程中不受污染。水樣從采集到檢驗不應超過4h ,在0~4℃下保存不應超過24h ,如不能在4h 內分析,應在檢驗報告上注明保存時間和條件。1、自來水取樣:應在水打開放水5min ,再用無菌容器接取水樣,待分析。如水樣內含有余氯,則采樣瓶滅菌后按每500mL水樣加3%Na2S2O3.5H2O溶液1mL。2、江、河、湖、池自然水體取樣:可用采樣器,采樣瓶應先滅菌。采樣后,瓶內應留有空隙。如果與其他化驗項目聯合取樣,細菌學分析水樣應采在其他樣品之前。

水質大腸菌群酶底物法檢測系統:由LK-2010國產程控定量封口機、51或97孔定量檢測盤、100mL定量瓶、酶底物檢測試劑四部分組成。檢測水樣范圍:飲用水、源水、瓶裝水、中水、二次供水、管網水、廢水、食品水、畜牧用水、用水等。初發酵試驗1、水樣稀釋:制備水樣10-1、10-2的稀釋液,方法為用無菌移液管吸取水樣10mL放于盛有90mL無菌水和若干玻璃珠的錐形瓶中,充分振蕩使混合均勻,并使其中的細菌盡量呈單個存在,即為10-1稀釋液;再從10-1制備10-2稀釋液。以此類推,稀釋到所需倍數。2、接種和培養:以無菌操作于5支三倍濃縮培養基(接種前一定應先檢查杜漢氏小管內有無氣泡)中各加入水樣10mL,5支普通培養基試管中加入水樣1mL,5支普通培養基試管中加入10-1稀釋液1mL, 小心混勻放入37℃培養箱中培養24h 。此即5管法。3、結果觀察:37℃中培養24h后取出觀察,觀察有無氣體(杜漢氏小管內有無氣體)和酸產生(培養基有無變色)。在48h之間,培養管內倒置的杜漢氏小管內有任何量的氣體積累,或培養基顏色從紫色變為黃色,便可初步斷定為陽性反應。

現代社會開展的水質凈化工作,其首要步驟便是混凝處理,只有在進行過這一步驟之后,方可開展后續的下沉、濾化等水質凈化工作。但是,從當前水質凈化工作的實際情況來看,部分地下水的綜合質量還有待進一步提升,這就需要在開展水質凈化工作時,采用較為特殊且更具科學化的技術。為此,相關部門要不斷提升水質凈化技術,并加強對水源的管理與控制工作,進而達到良好的凈化水資源的效果。

多管發酵法是根據大腸菌群能發酵乳糖產酸產氣的特征,檢測水樣中大腸菌群的方法。多管發酵的大腸菌群陽性,如果在44.5℃的培養基上進行24h的培養,能釋放出熒光產物而使培養基在紫外光源的照射下呈現熒光反應,此種方法即可檢測出樣本中是否含有大腸,具體步驟:取一定量水樣于乳糖蛋白胨培養液中進行初發酵實驗(推測實驗),再進行平板分離(證實實驗)復負發酵實驗鑒定(完成實驗)。

根據各稀釋度發酵的管數查可能數(mostprobablenumber,MPN)表,求得每10mL或每升水樣中的大腸菌群數。該法方法簡單,實驗的要求和成本低,但是該方法易受其他因素的干擾而影響結果的準確性。

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