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細胞實驗中的化學染色
1. 細胞實驗中細胞經jia基綠一呱咯寧混合液處理后,其中的 DNA 和 RNA 出現不同的呈色反應,一般認為這是由于帶有負電荷的核酸對堿性染料呱咯寧和jia基綠具有親和力,且這兩種染料的作用有選擇性,jia基綠染高聚分子的 DNA 呈藍綠色,呱咯寧染低聚分子的 RNA 呈紅色。Masson染色可用作心梗模型、肺纖維化、肝纖維化以及纖維化模型的定性與膠原纖維沉積的半定量分析。由此對細胞中的 DNA 和 RNA 進行定位、定性、和定量分析。
2. 由于不同的蛋白質分子所帶的堿性和酸性基團的數目不同,在 pH 值不同的溶液中,蛋白質分子所帶的凈電荷多少不同。如在生理條件下,整個蛋白質所帶負電荷多,則為酸性蛋白質;帶正電荷多,則為堿性蛋白質。透射電子顯微鏡(TransmissionElectronMicroscope,TEM)是使用zui為廣泛的一類電鏡。據此,可將標本經三氯醋酸處理提出核酸后,用不同 pH 值的固綠染液分別染色,使細胞實驗中細胞內的酸性蛋白和堿性蛋白質顯示出來。
3. 過氧化物酶能把許多胺類氧化為有色化合物,用聯ben胺處理標本,細胞實驗中細胞內的過氧化物酶能把聯ben胺氧化為藍色的聯ben胺藍,進而變為棕色產物,因而可以根據顏色反應來判定過氧化物酶的有無或多少。
4. 組織、細胞的多糖、粘多糖及粘蛋白等都可用 PAS 法來顯示,其化學基礎是利用guo碘酸的氧化作用,打開碳鏈形成醛,生成的醛基與 Schiff 試劑中的無色品紅反應形成紫紅色化合物。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹番紅-固綠(骨)染色:番紅O-固綠染色可直觀反映關節、下的骨組織結構,呈紅色,成骨呈綠色,對比鮮明,區分清晰,在關節及下骨的形態學研究中備受青睞。
嗜堿性的組織與堿性染料番紅O結合呈現紅色,嗜酸性的骨組織和酸性染料固綠結合而呈綠色或藍色。本質上,番紅O與蛋白聚糖中的多聚陰離子物質(硫酸素和硫酸角質素)成正向比例結合(離子濃度),不與膠原結合,可間接反應基質中蛋白聚糖的含量與分布。大鼠胃yan模型【模型特點】模型成功率高,模擬了慢性萎縮型的多因素作用過程,與本病的發病機制有相似之處。正常的基質分布均勻一致,當受到損傷時,創傷刺激可使基質中糖蛋白立即釋放活化,使基質成分發生變化,導致番紅O淡染,甚至失染。固綠可與結構疏松的膠原纖維牢固結合,不宜褪色。
簡要流程:石蠟切片/細胞爬片/冷凍切片→脫蠟至水→固綠染色→番紅O染色→脫水、透明、封片(中性樹膠)→番紅O-固綠染(成骨呈綠色,呈紅色)。南京英瀚斯,的病理染色實驗服務平臺。
病理實驗外包,病理染色常見染色介紹TUNEL染色:基因組DNA斷裂時,暴露的3’-OH可以在末端脫氧核苷酸轉移酶(Terminal Deoxynucleotidyl Transferase, TdT) 的催化下加上熒光素 (FITC) 標記的dUTP (fluorescein-dUTP) ,從而可以通過熒光顯微鏡或流式細胞儀進行檢測,這就是TUNEL (TdT-mediated dUTP Nick-End Labeling) 法檢測細胞凋亡的原理。南京英瀚斯生物科技有限公司病理染色-天狼星紅天狼星紅染色是顯示膠原纖維分布的經典染色方法,它是一種強酸性陰離子染料,與膠原纖維中堿性基團結合,故而顯示膠原纖維的定位。 實驗步驟
使細胞或組織貼在載玻片上?固定?洗滌?通透?洗滌?預平衡?用熒光素12-dUTP標記斷裂的DNA鏈?終止反應?洗滌?封片?分析樣品南京英瀚斯,的病理染色實驗服務平臺。
病理實驗外包,病理染色膠原纖維染色法
1.Van Gieson(V.G)***-酸性品紅法
鮮紅色:膠原纖維
黃色:肌纖維、細胞質、紅細胞
藍褐色:胞核
2.天狼星紅(Sirius red)***染色法
紅色:膠原纖維
綠色:細胞核
黃色:其他
另:天狼星紅***染色法:(偏光顯微鏡) Ⅰ型:強雙折光性,呈黃色或紅色纖維 Ⅱ型:弱雙折光,呈多種色彩疏網狀分布 Ⅲ型:弱雙折光,呈綠色的細纖維 Ⅳ型:弱雙折光的基膜,呈淡黃色